果蝇的观察

1. 果蝇成蝇的麻醉：为便于观察，可将果蝇预先麻醉。将成蝇放入麻醉瓶，立即盖好瓶盖，瓶盖附有棉花团，预先滴上少量乙醚。大约半分钟后， 成蝇会被麻醉昏迷。将其倾倒在白纸上进行观察。注意果蝇麻醉过度会死亡， 死亡果蝇翅外展，与身体呈 45°角。被麻醉的果蝇不直接放回培养基上，以免粘住。最好将果蝇先放在消毒滤纸做成的小圆锥体中，一同放入瓶内；或暂时先将培养瓶侧卧。

2. 果蝇的生活史：从果蝇卵到成虫期约需 10～15 天。成蝇存活约 15 天。羽化后的果蝇一般在 12 小时后开始交配，两天后产卵。卵长约 0.5 毫米，呈白色，椭圆形，其前端有触丝。1～2 天后，从卵孵出幼虫。经过两次蜕皮， 3 龄幼虫长约 4.5 毫米，肉眼可见一端稍尖为头部，有一黑点为口器，稍后有一对半透明的唾腺。约 5～8 天后，变成蛹，呈梭形。再经 4～6 天左右， 从蛹羽化出成蝇。

3. 果蝇外部形态：果蝇成蝇分头、胸、腹三部。头部有 1 对大复眼，由

779 个小眼组成，3 个单眼和 1 对触角；胸部有 3 对足、1 对翅，在最后 1 对

足和翅之间有 1 对平衡棒；腹部背面有黑色条纹，腹部腹面有腹片，腹部末端有外生殖器。

1. 果蝇的雌雄鉴别：根据主要特征可鉴别成蝇的雌雄。一般从腹部末端形状、背面条纹数目，也可以立即予以辨别。

表 1 雌雄果蝇的区别

1. 几种常用突变型 野生型果蝇所具有的性状特征为正常型，多为显性性状，这是以+或以相应性状的英文的第一个大写字母或再附加一个小写字母表示，例如野生型果蝇为灰体（E），正常翅（V），红眼（W）等。而其相应隐性突变型用小写字母表示，显性突变和畸变型用大写字母表示，例如棒眼

（Bar，B）（表 2）。

果蝇的有性杂交 掌握有性杂交可以观察基因的显隐性，研究遗传变异规律，如分离律、自由组合律及伴性遗传等；进行基因定位等。一般用 x² 测验，检测所得结果是否符合遗传定律。

将具有一对相对性状的个体杂交，如长翅（VgVg）母本×残翅（vgvg） 父本，或者灰体（EE）母本×黑檀体（ee）父本，以这些交配为正交，则反过来，残翅（vgvg）母本×长翅（VgVg）父本，或黑檀体（ee）母本×灰体

（EE）父本为反交。通过这些正、反交配，可以观察到杂种第一代和杂种第二代的杂合体（VgVg 或 Ee）总是表现长翅或者灰体。这是因为显性基因（Vg 或 E）压倒隐性基因（vg 或 e）的缘故。并且通过分析杂种第二代性状，呈 3 显∶1 隐比例，可以验证分离规律。

表 2 果蝇突变型的特点

实验步骤：以果蝇长翅×残翅为例说明。杂交母本要用处女雌，以保证杂交结果的可靠性。因此，需要将培养瓶内已孵出的成蝇全部移出，再将后来 8～12 小时内孵出的果蝇收集作母本用。按杂交组合挑选 10 对左右雌、雄果蝇，放入培养瓶，在瓶上注明杂交亲本、杂交日期。挑选果蝇可在麻醉状态下进行。当杂交 7～9 天后，F1 孵出之前而蛹已变黑时，移出亲本以避免亲子代混杂。F1 孵出后，观察记载其表现型（翅膀大小）。然后，取大约 10 对 F1 雌、雄果蝇放入新的培养瓶中交配。当 F1 交配 7～9 天后，F2 孵出前， 移出 F1 亲蝇。F2 孵出后，每天观察计数 F2 各类表型的个体数目，连续 8～ 10 日。最后将实验结果按下列表格整理统计。

对 F2 结果，还可以进行 X2 测验分析。X2 即卡平方，表示实得数与理论

数间的差异。算出 X2 后，通过查 X2 表（表 3）可求出概率（P）。查表时需要确定自由度（n），这是指可以自由变动的项目。等于观察项目减 1，本实验 n=2-1=1。

试验编号： 杂交组合： 杂交日期： F1 及 F2：

x2 测验：

x2 = (O − C)2 =

C

P =

根据 P 值可以判断实验结果是否符合理论比例。如 P＞0.05，即实验结果与预期理论规律相符合。如 P≤0.05，则为不符合。

如果要验证自由组合规律，则用两对相对性状的实验结果分析。此处自由度（n）=4-1=3。当进行伴性遗传实验时，可选用雌性白眼（X^wX^w）×雄性 红眼（X-Y），也可用雌性红眼（X-X-）×雄性白眼（XWY）。上述各种类型的杂交实验步骤都是相同的。

X² 表

果蝇唾腺染色体的制片及观察 果蝇唾腺染色体又称巨大染色体，多线染色体，它宽约 5 微米，长约 400 微米，相当于普通染色体的 100～150 倍。因为染色线复制，但不分开，使一条染色体内含有 1000～4000 多条染色线。

果蝇有 4 对同源染色体（2n=8）。其同源染色体具有体细胞染色体配对因而能紧靠在一起的特点。第 1 对为性染色体，X 染色体呈棒状，Y 染色体呈J 形；第 2，3 对染色体呈 V 形，各带左（L）右（R）两个臂；第 4 对为不易看到的盘状或点状染色体。染色体上有带纹，这是染色线紧密螺旋盘绕的部位。带纹的数目、宽窄及排列顺序是一定的已分区编号。有的学者提出带纹

是基因所在部位。实验步骤：

1. 幼虫的培养：为了制备好的唾腺染色体玻片标本，首先需要有合适的培养条件以得到肥大的幼虫。（1）制片前 7～10 天，将果蝇接种在培养基上， 为避免个体多，接种适当少些，一培养瓶中以 10 对左右为宜。最好每两天将亲本移换一次，以免产过多的卵。（2）将培养瓶移至阴凉处，大约为 16～ 18℃。（3）用营养丰富的合适培养基，可以补加些酵母粉，适当增高水的比例和降低琼脂比例。在幼虫出现后，还可往培养基中补加 2～10％的酵母液数滴。

2. 唾腺的剥取：选肥大的即将化蛹的三龄幼虫，放于载片上，加 1 滴生理盐水。于解剖镜下，用解剖针按住幼虫后部 1/3 处，另一手持针压住头部向前拉，将头部从身体拉开，唾腺即随之而出。这是一对半透明的长形小囊， 其前端呈三叉形。尽可能把附在腺体旁边的脂肪剔除。除去幼虫残体。

3. 压片：先将唾腺加一滴 1N 盐酸，处理 2～3 分钟，用滤纸吸干盐酸， 再用蒸馏水洗 2～3 遍，再吸去多余水分。滴加醋酸洋红染液（或改良品红， 龙胆紫等）。染色数分钟至 20 分钟，待唾腺着色后，盖上盖片于显微镜下观察，可看到细胞核呈红色，说明其中的染色体已着色，此时进行压片。在玻片上下加滤纸适当加压，可用铅笔滚压，或用镊子、拇指、橡皮头敲压，将核压破，使染色体伸展开。显微镜下可观察染色体的形态和染色体横纹。

若熟悉幼虫的解剖，也可在染色液中直接剖出唾腺，染色约 10 分钟，待唾腺着色后，加盖片、压片。

1. 永久片的制备：为了将染色体玻片标本临时保存数天，可用石蜡将盖片周围封住以防干燥。如需长久保存，将玻片标本放入 70％酒精或冰醋酸中，待盖片自然脱去。经 95％酒精、纯酒精脱水各 1～5 分钟，再经二甲苯透明 5 分钟，最后用中性加拿大树胶封片。