底物水平磷酸化

（substratelevelphosphoryla-tion）指高能化合物的放能水解作用或与基团转移相偶联的 ATP 合成作用。不包括光合磷酸化或呼吸链中氧化磷酸化的 ATP 生成过程。例如：糖酵解途径中产生的高能磷酸化合物甘油酸-1， 3-二磷酸和烯醇式磷酸丙酮酸在酶的作用下，高能磷酸基团转移到 ADP 分子上生成 ATP。又如三羧酸循环中产生的高能硫酯化合物琥珀酰辅酶 A 在酶的作用下水解成琥珀酸，同时使 GDP 磷酸化为 GTP，GTP 再与 ADP 作用生成 ATP。这些都是底物水平磷酸化的实例。底物水平磷酸化没有共同的作用机制。