显微镜光度术

(microscope photometry)显微镜成像与光度测量相结合的技术。将标本置于载玻片上,通过透射光、荧光、反射光或者光的干涉等方式首先造成清晰的显微镜影像,然后通过光度装置对显微镜下影像的光强度和光谱进行测量和分析。由于所测的光强度和光谱分析与样品中某种成分具有一定的化学计量学关系,所以这种仪器能在光学显微镜的分辨水平上对细胞、细胞器和生物组织的化学成分进行原位的定量分析和光谱分析。

1936 年瑞典生物学家卡斯珀松(T.O.Carspersson)首先设计和使用显微镜光度术测量细胞中核酸对紫外光的吸收,在细胞原位间接测定了核酸的含量。

根据光与物质相互作用的性质,生物学和医学研究主要利用三种类型的显微镜光度术:显微镜吸收光度术(利用透射光成像)、显微镜荧光光度术和测量放射自显影银颗粒反射光的显微镜反射光度术。显微镜光度计的装置如图所示。

近代的显微镜光度计,配备有多功能显微镜、扫描系统、光谱测量系统和计算机系统,不仅能作原位定量分析,还能作一些粗略的形态学测量(如细胞大小、核质比),从而成为生物学医学中广泛应用的一种定量分析仪器。