电泳
(electrophoresis) 利用电泳原理分离物质的方法。带电质点在电场的作用下向着与其电性相反的电极移动,这种电泳现象在 19 世纪初期已被发
现,但在 1937 年瑞典科学家蒂塞利乌斯(A.W.K.Tiselius)制成研究蛋白质的电泳仪后,电泳才成为生物化学的一项方法。蒂塞利乌斯最初发明的方法较复杂,仪器也较昂贵,为不用支持物的自由电泳技术;后来采用滤纸作为支持物,形成了设备简单,操作方便的纸电泳,电泳技术遂在生物学和医学的各个领域内得到广泛的应用和发展。近年来,不但自由电泳的方法和仪器装置得到种种改进,新型支持物也不断涌现。使用支持物的电泳应用比较广泛。依照支持物的物理性状,这类电泳技术大体可分成 4 类:(1)滤纸及其他纤维:如玻璃纤维、醋酸纤维、聚氯乙烯纤维薄膜电泳。(2)凝胶区带电泳:如琼脂、聚丙烯酰胺凝胶、淀粉凝胶电泳。(3)粉末区带电泳:如纤维素粉、淀粉、玻璃粉电泳。(4)线丝电泳:如尼龙丝、人造丝电泳。
电泳有垂直式和水平式两种类型。一般使支持物的两端浸在一定的缓冲液中,并在润湿的支持物上点上样品和标准物后在相同的条件下电泳。电泳后比较所分离质点与标准物的泳动度(或迁移率),可对每个质点进行定性或定量测定。泳动度的定义是带电质点在单位电场强度下的泳动速度,即:
u = V = d / t = dl
E V / l Vt
式中: u 为泳动度(厘米 2/伏·秒或分); v 为质点的泳动速度(厘米/秒或分);E 为电场强度(伏/厘米);d 为质点泳动距离(厘米);l 为支持物的有效长度(厘米);V 为加在支持物两端的实际电压(伏);t 为通电时间(秒或分)。
泳动度首先取决于质点的性质,如质点所带净电荷的量,质点的大小和质点的形状,但也受外界因素的影响,如电场强度,溶液的 pH、离子强度、粘度等。