显微摄影的三大技术要领
取景对焦 显微摄影通过取景器的测视目镜,确定拍摄的范围及物体影像在底片上的大小。对焦是使影像在底片上清晰聚集,以保证拍摄的显微照片清晰可靠。
正确曝光 曝光是显微摄影中的重要关键。曝光的正确与否决定着照片的质量。
影响曝光时间的因素非常多,例如底片的性能、照明光源的强度和色温
(光谱成分)、照明方法、滤色镜的种类、物镜的数值孔径和倍数、目镜的倍数、摄影机皮腔的伸长度、被摄物体的颜色和光学性质等等。因此,想通过计算的方式来求得正确的曝光时间实际上是不可能的。实际工作中常以自动曝光或试摄测定来确定曝光时间。如上所述,影响曝光的因素尽管很多, 但是,大部分条件的改变几乎都影响到光强度的变化,因此才使我们利用自动测光曝光成为可能。这是因为在所有的摄影中,总曝光的时间(E)是决定于光强度(I)与曝光时间(T),两者关系为:E=IT,在一般光强度的范围内,两者可以互换,例如,光强度增加一倍和曝光时间减半,其总的曝光时间不变。
增强反差(1)感光片的反差:不同的感光片具有不同的反差性能,一般而言,感光速度快的,其反差较弱,感光速度慢的,其反差较强。(2)滤色镜的使用:一般的生物学医学标本通过显微镜照相,往往存在反差较小的弊端。因此,在光路中通过增加滤色镜来控制照明光线以及增加底片上的反差是很有必要的。
显微摄影时,为了提高标本影像的反差,以期获得理想的底片,选择滤
色镜的颜色应是标本的互补色。因为这是由于滤色镜对各种色光有选择吸收的特性,凡与滤色镜颜色相同的色光则能透过,而与之互补的色光则被吸收, 从而增加了反差。相反,如果反差太大,会使标本的细微结构显示不出来。为了既能显示标本的显微结构,又能得到合适的反差,可以选择适当的滤色镜成对地配合使用,以期获得最佳的反差效果。
如果将显微摄影装置上的照相机用电影摄影机或电视摄像机来代替,即可改造成为显微电影或显微录像。因为三者的基本原理是一致的。