C：加入乙酰唑磺胺

金属酶与抑制剂作用引起的电子吸收光谱变化，是研究酶作用机制的有效途径，特别是那些结构上与底物相类似的抑制剂，往往以与底物相似的方式作用于酶。图 6 示出几种不同抑制剂作用于 Co（Ⅱ）-碳酸酐酶的电子吸收光谱。谱图最低限度可提供两方面信息：一是抑制剂加入前后酶的 d－d 谱有了变化，这是抑制剂直接结合于 Co（Ⅱ）离子形成过渡态三元配合物的标志；另一是抑制剂 CN^{-和乙酰唑磺胺与酶结合后，谱图反映出过渡态三元配合物基本上是四面体型的。但另一些抑制剂如硫氰酸盐与酶之间的三元配合物则为近似于四角锥型或三角双锥型的五配位配合物。不论形成哪一种形式的过渡态配合物，具有催化功能的金属离子都会经历一个从不规则的配位环境到另一个规则的配位环境的转变。}

用质子 NMR 弛豫速率方法测定酶中金属离子的配位水，可以进一步了解抑制剂与碳酸酐酶中 Co（Ⅱ）离子作用的方式。实验结果表明形成四配位过渡态三元配合物时，Co（Ⅱ）离子没有配位水，而在五配位时有一个配位水分子。这样，抑制剂配位于 Co（Ⅱ）离子的方式如上图。综上所述，应用配位化学理论方法与近代物理技术于生物大分子结

构与功能的研究，已经成为生物无机化学研究的重要方面，并且已经取得了丰硕的成果，相信在今后几十年内，上述研究方法在生物无机化学领域会得到更大的发展。