酶标记伏安免疫法

非均相法这种方法首先是将抗体固定（惰性吸附或共价键合）在聚苯乙烯容器表面上。表面上的空位置用 Tween-20 结合之。然后将酶标记的抗原（Ag^*）和抗原试样（Ag）加入容器中，让其与容器表面上有限的抗体进行竞争反应。待一定时间后，洗去游离的抗原。这时，由于竞争反应的结果，与容器表面上抗体相结合的标记抗原量与试样中的抗原量成反比。然后加入基物，让其与 Ag^*中的酶相互作用，得到电活性产物 P，最后用伏安法进行检测。这一过程可用图 1 表示。这种方法已成功地应用于强心药地高辛（digoxin），免疫球蛋白（IgG）及糖蛋白的测定。

另一种定量方法是形成夹心式化合物的定量法。在这种方法中将抗原试样加入固定了一定量抗体的容器中，让抗原与抗体进行反应。达到平衡后，洗去游离的抗原。然后加入另一种酶标记的抗体，使其与抗原再反应，形成夹心式化合物。洗去过量的酶标记抗体，再加入适当的基质 S。这时，在酶的催化作用下，基质转变为具有电活性的 P，从而进行测量之。在这种情况下，电信号与被测抗原成正比。这一过程可用图 2 表示。这种方法已应用于免疫球蛋白的测定。