六、实验指导

本实验教师进行指导后，由学生独立实验。可分为叶绿体色素的提取， 制备层析纸条，画色素线或点，展开色素层等四个步骤。

（一）叶绿体的提取

剪取叶片时要注意应把叶柄和大叶脉除去，叶片尽量剪碎。研磨时不应捣，而是以均匀的速度，按一定方向研磨。丙酮要适当加量，以补充研磨过程中挥发的损失。为避免堵塞毛细吸管，可用纱布包着叶片研磨。

在过滤时应注意，漏斗基部的脱脂棉花不能太多，以免吸干滤液。绝对不能在漏斗中用研磨杆压挤过滤，免损坏漏斗。

滤出的叶绿体色素液应加盖，并避光保存。

（二）制备层析纸条

应注意保持纸的干燥，勿使其受潮，以免影响层析结果。可以将滤纸端剪成梯形，还可以呈楔形。

（三）画色素点或线

可在滤纸条上梯形端画线，滤纸条的楔形端打点。干燥后再重复，直到色素点、线呈浓绿色为止。注意勿使毛细管折断。

（四）展开色素层

应注意层析液不要没及纸上的线或点，看到橙黄色上升至一半即可取出，以免胡萝卜素扩散过度而消失。

另外一种展开色素层的方法是：用细小的绘图笔尖或毛细玻璃管，沾些叶色素提取液，使笔尖在圆形滤纸中心垂直接触 3～5 分钟，可看到以笔尖为圆心向外扩展成不同颜色的同心圆。

为提高实验效果，有的中学在实验结束后进行评分，其标准是：凡有色素展开的评 60 分，每色素带分明各评 10 分。