五、实验指导

教师指导实验时，还应强调一下高倍镜使用注意问题。以后由学生独立实验。可分为根尖培养、取材固定、解离、染色、压片及观察等六部分。各学校根据实际，决定学生从哪一部分开始操作。

（一）根尖的培养与固定（见实验准备）。

（二）解离

从固定液中取出洋葱根尖，取 95%酒精洗去醋酸，再投入解离液中，使细胞间果胶层解离，细胞易于分散和染色以便观察。解离时间必须掌握好。要根据材料及季节决定。时间过短，细胞不易分散；时间过长，细胞及细胞核形态被破坏。可用镊子轻轻按伸长区，以感酥软而不散为宜。解离后用镊子夹取根尖，注意不要夹在生长点部位。

如果实验课正好在根尖分裂高峰期里，可让学生取材并同时进行固定、解离。把固定液与解离液按 1∶1 的比例混合，将根尖投入其中，一定时间取出就可染色压片。这可节省时间。

（三）染色和压片

将解离后的根尖放入清水浸 10 分钟，以洗净盐酸便于染色。再取出根尖置载片中央，用盖片轻轻切去伸长区，留下根尖生长点。从根尖起切取 1.5～ 2 毫米一段的生长点，滴上染液，然后用解剖针将根尖剖开捣碎。具体染色时间教师需先进行试验再确定。一般龙胆紫染 3～5 分钟，醋酸洋红 15～20 分钟，改良苯酚品红 10～15 分钟。染色时注意防止染色液蒸发而变干。

压片时应注意，加上盖片后，再复以 2～3 层吸水纸，用手指轻轻按压盖片，然后用铅笔的橡皮头轻轻均匀地敲打盖片，至肉眼见材料呈雾状即可。

敲打时，铅笔应垂直于玻片，勿使盖片移动。

（四）观察

先在低倍镜下，找到分散较好的生长点细胞，并将处于分裂期的细胞移至视野正中。换上高倍镜，调细准焦螺旋，直至看清物像为止。观察时应找出细胞分裂间期和有丝分裂各期的细胞，注意各期细胞内染色体的变化，并让学生数清染色体数目。为使学生认识植物细胞有丝分裂过程的连续性并巩固有关知识，在观察前后，可放植物细胞有丝分裂录相（时间仅 8 分钟）。为保证实验效果，学生实验结束，可逐个评分。有的中学评分标准是：

在低倍镜下找到生长点细胞，得 60 分，如再看到分裂期四个时期的细胞各期

加 10 分。

实验十四 叶绿体中色素的提取和分离

本实验是高中生物较重要的实验，但中学在准备材料、掌握实验技能、原理和指导实验等方面尚有一些困难。作此实验以解决有关主要问题。