四、实验准备

(一)试剂的配制

  1. 固定液 三份 95%酒精和一份冰醋酸混合。

  2. 解离液 38%盐酸和 95%酒精以 1∶1 混合。

  3. 染色液

(1)0.5%龙胆紫液:1 克龙胆紫加 200 毫升蒸馏水。

  1. 1%醋酸洋红:100 毫升冰醋酸加 1 克洋红煮沸 30 秒,冷却后过滤即可。还可在冷却时加一枚生锈的小铁钉,或在冷却后加 1~2%铁明矾水溶液数滴,直至此液变为暗红色而不发生沉淀时,再进行过滤。

  2. 改良苯酚品红染液:取 3 克碱性品红,溶于 100 毫升 70%酒精里, 配成母液 A,可长期保存。取出母液 A10 毫升,加入 90 毫升 5%苯酚水溶液, 配成母液 B。再取 45 毫升的母液 B,加入 6 毫升冰醋酸和 6 毫升 37%的福尔马林,此液即苯酚品红染色液。取 10 毫升苯酚品红染色液加入 90 毫升的 45% 的冰醋酸和一克山梨醇,此液即为改良苯酚品红,可长期保存,时间越久效果越好。

(二)实验材料的准备

以下工作一般是教师作,有的中学交给学生,效果更好。

1、根尖的培养 实验前 3~4 天,取洋葱若干个,分别置于口径小于葱头的小烧杯或广口瓶上。杯内盛清水,使洋葱底部接触到杯内水面。或取健壮的大蒜瓣,剥去外皮,用牙签并排串连,放入培养皿,使其中清水浸没蒜瓣根部。或取饱满的蚕豆、小麦、玉米种子用清水泡 1~2 天,待种子吸水膨胀后,取出置于垫湿润滤纸或草纸的培养皿中。以上根尖培养均应保持室温 20

℃左右。

2.根尖取材与固定 待根尖长到 1~2 厘米时(注意不宜过长),根据各种植物细胞有丝分裂高峰期,剪取根尖放入盛有固定液培养皿内浸泡 2~4 小时后,取出放入 70%酒精保存备用。为能看到更多的分裂中期细胞在固定前可进行根尖前处理,最简便的是低温处理,即将盛根尖小瓶放冰箱 0~5℃ 中 20 小时左右,或放 0℃冰水中 24 小时。不同地区、品种、日照、温度、植物根尖细胞有丝分裂的高峰各不相同。下表(表 30)是笔者 1986 年 9~10 月在昆明所作实验结果,列出供选根尖取材时间参考。

(三)制作示范片与绘图

为使实验课顺利进行,教师必须事先选择细胞较分散、分裂期细胞较多的装片,用蜡封片后作示范片。并用显微镜示范。或将临时装片在室温下用湿布盖好保湿。揭开盖片,注意不要滑动。将盖片材料向上,在 20~30℃烘箱上烘 5 分钟。取一张干净载片在酒精灯上过火 2~3 次,冷却后加一滴加拿大树胶。再将盖片材料向上迅速过火 2~3 次,随即封片。将封片水平放置一周或放烘箱 30℃烘干,即可得永久封片。

(四)布置预习

  1. 明确本实验的目的要求及方法步骤。

  2. 复习高倍镜的使用及注意事项。必要时还要组织实习预备课进行练习。

  3. 熟悉植物细胞有丝分裂各时期的特征。

  4. 掌握生长点细胞的特点,了解根尖各部分细胞的形态。

  5. 培训小组长,要求练习从根尖培养到观察的每个步骤。