二、工人体检及实验室检查

（一）体格检查

要详细询问、记录工人的职业史。工种、工龄以及接触何种可疑有害因素。既往病史以及当前的主观症状。

体格检查项目除进行全面一般检查外，应着重有关职业病的特殊检查， 最好请有关专科医生参加，如噪声体检有耳鼻喉科医生参加，铅、汞、锰等中毒体检有神经科医生参加，尘肺体检有放射科医生参加等。

在实验室检查方面，某些职业病的特殊检验项目有重要价值，如某些毒物在生物材料中的浓度测定，肝、肾功能改变、血液化验以及某些酶学改变等。

（二）化验检查

尿汞测定：

**【原理】**在碱性条件下二氯化锡可将尿中的汞还原成原子状态的汞，然后随一定流速的载气（空气）流入 590 型或 F732 型汞蒸气测定仪，测定其中之汞含量。

**【器材】**汞蒸气发生管（可用小型包氏吸收管代替）；590 型或 F732 型汞蒸气测定仪；50ml 容量瓶；100ml 三角烧瓶。

【试剂】

配制试剂及分析用水需要双蒸或离子交换无汞水。汞标准液：

  1. 二、工人体检及实验室检查 - 图1贮备液：精确称取 0.1354g 氯化高汞（A.R.），用 0.125M 硫酸使其溶解，并稀释到 100ml，此溶液 1ml 1mg 汞。

  2. 二、工人体检及实验室检查 - 图2二、工人体检及实验室检查 - 图3应用液：临用前配制。吸取上述贮备液 5.0ml，用蒸馏水稀释至250ml，此溶液 1ml 20μg 汞。再吸取上述应用液 5.0ml，用双蒸水稀释至500ml。此溶液 1ml 0.2μg 汞。

【操作步骤】

  1. 汞标准曲线的绘制取小包氏吸收管 6 只，按下表配制标准管。

管号

 0 1 2 3 4 5

汞标准应用液（ ml ）

 0 0.10

0.30

0.50

0.70

1.0

蒸镏水（ ml ）

4.5

 4.4

4.2

4.0

3.8

3.5

含汞量（μ g ）

 0 0.02

0.06

0.1

0.14

0.2

(1)用毛细管加入辛醇 1 小滴，可防止尿样在通气时产生大量泡沫。(2)沿吸收管壁加入碱性氯化亚锡溶液 0.5ml，立即送入流量为 2L/分的

干燥清洁空气，并同时读取微安表的最大读数值。

(3)根据汞的含量与最大读数值的关系，绘制标准曲线。

  1. 尿样测定取新鲜、混匀的尿样

    4.5ml（如尿汞含量高时，可适当减少尿样，再加蒸镏水至 4.5ml）加入包氏吸收管内。以下步骤按“标准曲线的绘制”(1)～(2)步骤进行。样品管读数减去空白管读数后，再查标准曲线得样品管中汞含量微克。

【计算】

尿汞含量（mg / L）＝ C

V

式中：C——样品管中汞含量（μg）； V——尿样用量（ml）。

【注意事项】

  1. 仪器需预热 30 分钟，并调节好空气载体的流量，待仪器稳定后再开始

测定。如给仪器增加 1 个稳压装置，常可使实验的重现性更好。

  1. 为使载气干燥，在空气进入尿样以前应先流经氯化钙干燥管，此管中的干燥剂应每周更换一次。

  2. 在测定含汞量较高的样品后，应取下吸收管，直接向仪器管道内送入干燥清洁的空气数分钟，指针才能回到零点。

  3. 所有玻璃仪器都必须彻底清洗。每次实验之后全部要放入 5%（V/V）

    硝酸中浸泡，以除去吸附在管壁上的汞及其他干扰物质。

  4. 仪器的排气口应装有活性炭汞蒸气净化器，或用橡皮管将排气口延伸至室外，以防止汞蒸气对室内空气的污染。

尿中δ-氨基乙酰丙酸（δ-ALA）测定：

**【原理】**在 pH 为 4.6 及温度 100℃的条件下，尿中δ－ALA 与乙酰乙酸乙酯缩合生成吡咯化合物。该化合物与对二甲氨基苯甲醛作用产生红色物质。尿中一些干扰测定的物质，预先用正丁醇在弱酸条件下萃取除去。最后

再用氯仿萃取，则红色物质转溶于氯仿中，从而与尿中残留的干扰物质进一步分离。根据氯仿层颜色深浅进行比色定量。

**【器材】**水浴锅；电炉；离心机；25 毫升具塞试管 14 个；2ml 吸管 2 支，5ml1 支，10ml1 支；水力泵或吸量管。72 型分光光度计。

【试剂】

  1. 正丁醇（A.R.）。

  2. 氯仿（分析纯）。

3.20%（V/V）醋酸取 20ml 冰醋酸，用蒸馏水稀释至 100ml。

  1. 磷酸盐缓冲液（pH=6.8）。
  1. 0.5mol 磷酸二氢钠溶液：称取磷酸二氢钠（NaH2PO4·2H2O）39.01g

（或 NaH2PO430.00g），用蒸馏水稀释至 500ml。

  1. 0.5mol

    磷酸氢二钠溶液：称取磷酸氢二钠（Na2HPO4·12H2O）89.54g，用蒸馏水稀释到 500ml。

以上两液等量混合即成。

  1. 乙酰乙酸乙酯磷酸盐缓冲液1 份乙酰乙酸乙酯中加入20

    份磷酸盐缓冲液即成（临用时需振摇，混合均匀）。

  2. 对-二甲氨基苯甲醛显色剂(1)4g 对-二甲氨基苯甲醛。(2)128ml 冰醋酸。

  1. 40ml70%高氯酸（原瓶浓高氯酸）。

  2. 10ml0.2mol 氯化高汞（称取氯化高汞 5.43g，用蒸馏水稀释至100ml）。

  3. 40ml 浓盐酸。

将上述试剂依次溶解，混匀，置冰箱中保存。7.δ－ALA 标准液

  1. 二、工人体检及实验室检查 - 图4浓标准液：准确称取氨基乙酰丙酸盐酸盐（ALA·HCl）25.6 毫克， 用蒸馏水溶解，移入 100 毫升容量瓶中，稀释至刻度。此溶液 1 毫升 200 微克 ALA。

  2. 稀标准液：取浓标准液 10 毫升于 100 毫升容量瓶中，稀释至刻度。

二、工人体检及实验室检查 - 图5此稀标准液 1 毫升 20 微克 ALA。本溶液在冰箱中可保存 20 天。

【操作步骤】

  1. ALA 标准曲线的绘制取 25 毫升具塞比色管 6 只，按表 5－18 配制 ALA 标准色列。

表 5 － 18 δ-ALA 标准色列配制

管号

ALA 稀标准液（毫升） 蒸馏水（毫升）

醋酸（毫升） 正丁醇（毫升） 比色时标准管内

ALA 含量（微克）

  1. 用力将上述各管振摇 1 分钟（约 100 次）。静置分层后，用水泵将

上层正丁醇抽出弃去。再用 1 毫升吸管，分别吸取底部标准液层 0.5 毫升，

移入 25 毫升具塞试管中。(2)各加入 1.5 毫升乙酰乙酸乙酯磷酸盐缓冲液，

摇匀后同时放入沸水浴中，加热 10 分钟，取出立即冷却至室温。(3)各加入

2 毫升对-二甲氨基苯甲醛显色剂，摇匀，放置 10 分钟。(4)各加 4 毫升氯仿， 加塞振摇萃取，此时氯仿层呈红色。

(5)用水力泵抽吸上层水液弃去。各加入约 1 克无水硫酸钠（注意勿使无水硫酸钠粘在上端管壁上），振摇脱水。静置，倒入比色杯中（注意切勿将沉淀的无水硫酸钠倒入比色杯中，以免影响结果）。(6)用分光光度计（556um 波长或绿色滤光片），以零管（或氯仿）调节零点，测其光密度。

(7)根据 ALA 的浓度和光密度的关系绘制标准曲线。2.尿样测定

  1. 准确量取尿液 2 毫升于 25 毫升具塞试管中，加 2 毫升 20%醋酸溶液，

振摇混匀后，再加入 8 毫升正丁醇，加塞，用力振摇 1 分钟（约 100 次），

静置分层后，用水力泵将上层正丁醇液抽出弃去。再用 1 毫升吸管，分别吸

取底部尿液层 0.5 毫升移入 2 个 25 毫升具塞试管中，一为样品管，一为尿空白管。

  1. 在样品管中加入 1.5 毫升乙酰乙酸乙酯磷酸盐缓冲液，尿空白管中加

入 1.5 毫升磷酸盐缓冲液。分别摇匀，同时放入沸水浴中加热 10 分钟，取出后立即冷却至室温。

  1. 以下步骤按标准曲线的绘制(3)～(6)进行。

  2. 此时样品管氯仿层呈红色，尿空白管一般为无色或呈微黄色。在 30

    分钟内用光电比色法进行比色定量。

样品管光密度减去尿空白管光密度，查标准曲线得样品管中 ALA 含量（微克）。

**【计算】**尿中 ALA 浓度（毫克/升）

= C 0.5

= 2C

式中：C——样品管中 ALA 含量（微克）

【注意事项】

  1. 加入正丁醇的目的是在弱酸性条件下除去尿中干扰物质，故加入正丁醇后需用力振摇，以便得到最好的萃取效果，并待液层分清之后方可吸取底层之样品液。

  2. 用氯仿萃取液进行比色前，需用无水硫酸钠彻底脱水，否则在氯仿层中往往有混浊现象，影响测定结果。

  3. ALA 含量在 0～10ug 范围内，标准曲线呈直线关系。10ug 以上由于氯仿萃取不完全而使直线弯曲。