外植体的选择与灭菌

一、外植体的选择

选择外植体时应考虑的各种因素

虽然所有的植物细胞都具有全能性，能够重新形成植株，但各种细胞在表现全能性、重新形成植株的能力并不相同。这种差别不仅表现在同一植株的不同部位、不同器官和不同组织上，而且还表现在植物种类、植株年龄、生长季节和生理状态上。因此，在决定选用一个合适的材料时，必须考虑以下一些因素：

①用哪一部分器官最适于作组织培养的材料；

②器官的生理状态和发育年龄；

③取材的季节；

④离体材料（外植体）的大小；

⑤取得离体材料的植株质量。

例如，许多兰科植物、石刁柏（Asparagus officinalis L.）和非洲菊

（Gerbera jamesonii Bolus ex Gard.）用茎尖作材料最合适，而旋花科植物用根比较合适，秋海棠和茄科的一些植物适合于用叶等等。一般说来，处于生长季节的较幼嫩的材料，容易培养，接种时较大的外植体则有较大的再生能力。对于仅仅诱导愈伤组织的外植体，材料大小并无严格限制，只要将茎的切段、叶、根、花、果实或种子等的组织切成片状或块状，接种在培养基上即可。切块的具体大小一般在 0.5 厘米左右，太小时产生愈伤组织的能力弱，太大时，又会在培养瓶中占地方太多。至于茎尖、胚、胚乳的培养，则按器官或组织单位切离即可。

外植体的两种类型

外植体可以分为带芽的外植体和由分化组织构成的外植体两种类型。(1)带芽的外植体如茎尖和侧芽等。培养这类外植体时，可以有两种作

法，一是诱导茎轴伸长，为此就要在培养基中多加入植物生长素和赤霉素；一是抑制主茎发育，促进腋芽最大限度生长，以产生丛生芽，为此则应在培养基中加入大量的细胞分裂素。选用带芽的外植体很有意义，因为这类外植体产生植株的成功率高，而且很少发生变异，容易保持材料的优良特性。

(2)由分化的组织构成的外植体。如茎段、叶、根、花茎、花瓣、花萼、胚珠、果实、花粉等。这类外植体大多由已分化的细胞组成，由它们再生成植株，大多有一个从分化状态回复到分生组织状态的脱分化过程。所以由这类外植体接种的材料，常常要经过愈伤组织阶段再分化出芽或胚状体而形成植株。由这类外植体形成的后代可能有变异。