(二)生物学实验常用试剂的配制
- 粘片剂
配方Ⅰ:鸡蛋清 50ml,甘油 50ml,水杨酸钠 1g。
配方Ⅱ:明胶 1g,苯酚结晶 2g,甘油 15ml,蒸馏水 100ml。将明胶加入水中,加热至 36℃使其完全溶解。再加苯酚和甘油,过滤后使用。
- 防腐剂
① 米粞内含米糠和碎米。
- 三氧化二砷防腐粉
三氧化二砷 2g,明矾 7g,樟脑 1g。
将药品研成粉末后,混合调匀即可。主要用于鱼类、两栖类、爬行类和哺乳类标本。具有防止皮毛腐烂和虫害侵袭以及保护毛发不致脱落的作用。
- 三氧化二砷防腐膏
三氧化二砷 5g,肥皂 4g,樟脑 1g,水 10ml,甘油少许。
将切成薄片的肥皂放入烧杯中,按比例(肥皂∶水=2∶5)加水浸泡 4 小时,即置于水浴锅中隔水加热至融化。然后,加入三氧化二砷和樟脑,并用玻棒搅匀,以免三氧化二砷沉淀,最后加入少许甘油调匀,待冷后凝成糊状即可使用。使用日久变稠时,可稍加温水调稀。主要用于鸟类标本,具有防止皮肤腐烂和虫害侵袭以及保护羽毛不致脱落之功效。
- 苯酚饱和水溶液
主要用于鸟类的头骨、裸区和脚趾等处,具有消毒防腐作用。3.染液
- 硼砂洋红
4%硼砂水溶液 100ml,洋红 2~3g,70%酒精 100ml。
将洋红加入 4%硼砂水溶液中,煮沸 30 分钟。静置 3 日后用等量 70%酒精冲淡,再静置 24 小时后过滤。
- 中性红
中性红 1g,蒸馏水 100ml。
- 锂洋红
洋红 2.5g,碳酸锂 1.5g,蒸馏水 100ml。
将洋红加入碳酸锂水溶液内,煮沸使其充分溶解,冷却后过滤即可使用。
- 苦味酸洋红
洋红 1g,氢氧化铵 1ml,苦味酸饱和水溶液 50ml,蒸馏水 50ml。
将洋红加于蒸馏水中后,再加氢氧化铵,边加边搅和,最后加苦味酸,2~ 3 日后过滤。
- 代拉菲尔德氏苏木精
甲液:苏木精 1g,纯酒精 6ml。
乙液:硫酸铝铵饱和水溶液 100ml。丙液:甘油 25ml,甲醇 25ml。
将甲液一滴一滴加入乙液中,随时搅动。曝晒于阳光和空气中约 7~10 天后,加入丙液。将混合液静置 1~2 月,至颜色变深为止。紧塞瓶口,放于阴凉处。使用时可将染液 1 份用 3~5 份蒸馏水稀释。
- 海登汉氏铁苏木精
甲液(媒染剂):硫酸铁铵(铁明矾)2~4g,蒸馏水 100ml。乙液(染液):10%苏木精酒精溶液 5ml,蒸馏水 100ml。
甲液用时配制。铁明矾应为紫色结晶,变黄后不能使用。乙液在用前 6 周配制,将 0.5g 苏木精溶于 5ml95%酒精中,置于轻塞的瓶中使其充分氧化。用时再加 100 毫升蒸馏水。此液可保存 3~6 个月。甲、乙两液不能混合。
4.注射色液
- 树胶注射液
先把阿拉伯树胶和硼砂分别制成溶液,然后按 2∶1 比例(质量比)混合后,加适量水于研钵中研磨,用数层纱布过滤。取少量滤液于试管中,加少
许酒精,如果变硬,则配制成功,否则应继续放置一段时间,并反复过滤, 直至浓度适宜为止。最后按需要加入适量颜料,方法是把颜料放在研钵中加少量水研磨,再倒入树胶溶液中,搅匀即成。
本液具有较强的抗化学侵蚀能力,适宜血管或其他管腔腐蚀标本的注射。为使注射液硬化,应把注射后的标本放于 90%酒精中浸渍,然后转入腐蚀标本过程。
- 洋红甘油注射液
洋红 1.2g,水 22ml,氨水 3ml,甘油 146ml,酸化甘油(甘油 142ml 加醋酸 4ml)146ml,95%酒精 73ml。
将洋红放于研钵中,加 3ml 水轻轻研磨,调成糊状。加入氨水使洋红溶解,再加甘油充分摇匀,最后加酸化甘油和酒精及剩余的水搅匀。
本液体用时不用加温,且容易注射。5.固定保存液
- FAA 固定液
50%或 70%酒精 90ml,福尔马林 5ml,冰醋酸 5ml。
- 卡诺氏液
无水乙醇 3 份,冰醋酸 1 份或无水乙醇 6 份,氯仿 3 份,冰醋酸 1 份。
- 绍丁氏液
甲液:升汞饱和水溶液 66ml,95%酒精 33ml。乙液:冰醋酸 1ml。
使用时甲、乙两液混合。
- Licent 液
1%铬酸 80ml,冰醋酸 5ml,福尔马林 15ml。
- 硫酸铜酒精保存液
水 35ml,硫酸铜 2g,冰醋酸 5ml,福尔马林 10ml,95%酒精 50ml。
此外,取碘化钾 2g,碘 1g,福尔马林 24ml,冰醋酸 4ml,蒸馏水 400ml 进行混合,较适于团藻的固定保存;福尔马林 50ml,酒精 50ml 与少许甘油混合,较适于动物解剖标本的固定保存;用于冬季野外采集动物标本时,福尔马林(10ml)、乙二醇(30ml)及蒸馏水(60ml)三者配合,除有固定保存作用,还有防冻作用。
6.培养基
- 酵母菌豆芽琼脂培养基
取 10g 黄豆芽于烧杯中,加水 100ml,加热煮沸 30 分钟后,用纱布过滤, 向滤液里加入葡萄糖 5g、琼脂 1.5g,补水至 100ml,继续加热使琼脂溶化, 冷却后接入酵母菌,置于温暖地方 1~2 天,就能培养出大量酵母菌。
- 衣藻白菜琼脂培养基
取白菜细切,榨取汁液,加十倍水稀释,然后加入 2%左右的琼脂或 10% 左右的洁净动物胶(白明胶)加热溶化,冷却后即可接入衣藻或其他小型藻类。若在培养基中再加入 1~2%的葡萄糖,培养效果更好。
- 葫芦藓培养基
琼酯 20g,硫酸钙 1g,硫酸镁 0.25g,氯化钾 0.25g,磷酸二氢钾 0.25g, 硫酸铁 0.01g,蒸馏水 1 升。混合后灭菌,撒入经次氯化钙饱含水溶液消毒的葫芦藓孢子,置弱光下室温 25℃左右培养。
- 蕨类培养基
硫酸钙 0.25g,磷酸钙 0.25g,硫酸镁 0.25g,氯化钾 0.08g,硝酸钾0.07g,氯化铁 0.005g,琼脂 8g,水 1 升。混合加热至溶化,分装于直径 7~
9cm 的培养皿中,使培养基厚 1~1.5cm,冷却后散入蕨类孢子,盖上盖,置于散射光下 25℃左右室温培养。
生物具有多样性,相应的生物培养基种类也很多,尤其是微生物与动、植物组织培养基内容最为丰富,这里只能就其与教学有关的作一简单介绍, 如果需要做更深层的工作,还需参阅有关的专著或资料。