一、免疫法测定

【基本原理】

妊妇尿内的绒毛膜促性腺激素(HCG)具有抗原性,能与相应的抗血清发生作用。如将吸附有 HCG 的胶乳与抗血清混合,可使胶乳发生凝集。利用这一原理可检查妇女是否怀孕。将被测定者的尿先与抗 HCG 血清混合作用一定时间后,再加入吸附有 HCG 的胶乳,若被测者已怀孕,则其尿中含有 HCG, 因抗血清已与尿中的 HCG 结合,以致抗血清作用消失,不使胶乳发生凝集, 胶乳呈均匀的乳液状。反之,则其中几乎不含 HCG,当其与抗血清混合后, 抗血清中的抗 HCG 抗体并未被消耗,当加入吸附有 HCG 的胶乳后,抗血清就与附有 HCG 胶乳结合,呈明显均匀的凝集颗粒。

【实验器材】

抗 HCG 血清(以下简称抗血清)、吸附有 HCG 的胶乳颗粒悬液(以下简称胶乳)、吸管、玻棒、孕妇尿、非妊娠尿。

【方法与步骤】

  1. 用洁净吸管在黑色背景的玻片上滴加被试尿 1 滴,再加抗血清 1 滴, 用玻棒搅匀,使液面直径约达 2.5cm 大小,将玻片前后左右慢慢地连续摇动0.5—1min。

  2. 滴加胶乳抗原 1 滴,用玻棒搅匀,并记录时间。连续缓慢地摇动2min,观察结果。如在 2min 内出现明显的均匀一致的凝集颗粒者为阴性;如在 2— 5min 出现凝集者为可疑;如在 5min 后不出现凝集颗粒者为阳性。每次须用非妊娠尿作对照。

【注意事项】 1.尿液混浊或呈絮状时,应离心沉淀后取上层清液使用。这试验以晨尿

为好。

  1. 胶乳抗原与抗血清应放在冰箱内保存,使用时使其接近室温,并事先摇匀。此试验一般应在 15℃以上进行,如果室温过低,反应缓慢,观察时间应延长至 4—6min。

  2. 滴加尿、抗血清及胶乳抗原,液滴大小均应一致。

【思考题】

本试验中胶乳不凝集是妊娠阳性还是妊娠阴性?为什么?