实验 78 肾上腺皮质与机体对有害刺激耐受力的影响

【目的要求】 1.学习用摘除法造成功能缺损,以了解研究内分泌腺功能的方法。

2.观察肾上腺皮质激素对机体的水盐代谢及应激能力等方面的作用。

【基本原理】

肾上腺皮质是维持生命所必需的。肾上腺皮质释放盐皮质激素、糖皮质激素和少量性激素。糖皮质激素参与体内糖、蛋白质和脂肪的代谢调节,并能增强机体对有害刺激的耐受能力;盐皮质激素则参与水盐代谢的调节。摘除肾上腺的动物可迅速表现出肾上腺皮质功能失调的现象,例如食欲下降, 低血压、肌无力和肾衰竭等,同时也表现出抗炎症、抗过敏能力下降及对有害刺激的耐受力下降。

【动物与器材】

成熟的雄性大白鼠(或小白鼠)20 只、常用手术器械、小动物手术台、台秤、酒精棉球、注射器、鼠笼、生理盐水、乙醚、1%NaCl 溶液、75%酒精。

【方法与步骤】 1.动物的分组和手术

  1. 动物的分组选择健康而体重相近(150g 左右)的雄性大白鼠 20 只, 称重和编号,分为 4 组,每组 5 只。各组动物的体重和健康情况应大致相似。第 1、2、3 组动物为摘除肾上腺的实验组,第 4 组为正常对照组。

  2. 肾上腺摘除术用乙醚麻醉大白鼠,腹位固定于小动物手术台上。剪去动物背部的被毛,用 75%酒精消毒手术部位和手术者的双手。手术器械也应用 75%酒精浸泡 10min。

在背部正中线作一长约 3cm 的皮肤切口,用镊子夹住皮肤边缘,将切口牵向左侧。分离两侧肌肉。在左肋骨下缘将腹壁剪一约 1cm 切口,以小镊子夹盐水棉球轻轻推开腹腔内的脏器和组织,即可在肾的上方找到淡黄色的肾上腺,直径约 2—4mm,周围被肾脂肪囊所包裹。用小镊子紧紧夹住肾上腺与肾之间的血管和组织,再用眼科剪或小镊子将肾上腺摘除。然后按上法摘除右侧肾上腺。

摘除肾上腺后,依次用线缝合肌层和皮肤的切口,用酒精棉球消毒皮肤的缝合口。手术后,各组动物应在同样条件下饲养。

对照组手术操作与实验组相同,但不摘除肾上腺。2.观察项目

  1. 肾上腺摘除对动物水盐代谢和存活率的影响手术后,第 1 组(去肾上腺)和第 4 组动物只饮清水;第 2 组(去肾上腺+盐水)动物饮 1%NaCl 溶液;第 3 组(去肾上腺+可的松)动物除饮清水外,每天灌服可的松两次,每次 50μg。

连续观察一周,每天记录动物的体重、进食情况、活动情况和肌肉紧张度及死亡率等。实验结果可列表进行比较。

  1. 肾上腺摘除对动物应激功能的影响进行这项实验的前两天,对存活的实验组(去肾上腺)动物和对照组动物都停止喂食,全部只饮用清水(即不再给予盐水和可的松)。

实验时,在每组中各取 2 只动物进行观察,比较它们在禁食 2 天后,在姿势、活动情况和肌肉紧张度等方面与禁食前有何变化?各组间的变化有何差异?

将动物移入 2℃冷室中,停止给药,保证动物饮水和食物,每日观察一次,记录其死亡情况。以存活率为纵座标,日数为横座标,作图表示。

【注意事项】 1.动物应编号,以免混淆,编号的方法可用黄色的苦味酸稀溶液在背部

写上号码;亦可用细铝丝穿过耳廓,悬挂一个有号码的小铝牌。 2.摘除肾上腺动物对有害刺激的抵抗力降低,动物应尽可能分笼单独饲

养,以免互相残杀。而且要喂以高热量和高蛋白的饲料。室温最好保持在 20

—25℃之间。

【思考题】 1.根据实验结果,比较分析肾上腺摘除后的效应和各组间效应不同的机

理。

2.动物实验中,为什么要进行对照试验?应怎样考虑和设计对照试验?

(谢申玲)