二、生物法测定

【基本原理】

妊娠尿内由胎盘分泌的绒毛膜促性腺激素（HCG）浓度逐渐增高，约在妊娠后 8 周左右达高峰，以后逐渐降低，稳定于低水平，于分娩时几乎不能测出。绒毛膜促性腺激素可刺激雄蛙（或蟾蜍）排精。因此，以雄蛙排精作用为指标测定尿液中的 HCG，可作为诊断早期妊娠的一项检验方法。

【动物与器材】

雄蛙（或雄蟾蜍）、弯嘴吸管、载玻片，显微镜、注射器、盖玻片、小铁丝笼、妊娠尿、非妊娠尿、任氏液。

【方法与步骤】

1. 选两只 100g 以上的雄蛙或雄蟾蜍，用弯嘴吸管分别从其泄殖腔内吸取少量液体，滴在载玻片上，在显微镜下观察尿液中有无精子存在。若有， 则需另选。

2. 取 5ml 非妊娠尿，注入其中一只的背部淋巴囊作对照；另一只则注射等量的妊娠尿。把蛙分别放入两个小铁丝笼内。

3. 注射 1 小时后，分别从泄殖腔吸取液体，在显微镜下检查，若实验组有精子活动，则为阳性反应，表明已妊娠。若无精子，则为阴性反应。

4. 发现精子后可加盖玻片，再用高倍镜观察精子的形态。蟾蜍精子的头部呈镰刀状，其后有一鞭毛状的细尾。

【注意事项】 1．作蛙或蟾蜍的背部淋巴囊注射时，针头应从后肢刺入，否则尿液将从

注射针眼流出。2．泄殖腔内有原生动物，观察时应与精子区别。 3．如果泄殖腔内的液体量很少时，可用滴管先注入少量任氏液，然后再

吸出。

【思考题】

试述用雄蛙进行妊娠检查的原理。

（谢申玲）