一、渗透性溶血——红细胞渗透脆性的测定
【动物与器材】
兔、3%红细胞混悬液、离心机、2ml 注射器、5ml 试管 10 支、5ml 吸管 3 支、试管架、滴管、洗耳球、3.8%柠檬酸钠、1%和 2%NaCl 溶液。
【方法与步骤】
1.3%红细胞混悬液的制备取兔血 2ml,加入盛有 3.8%柠檬酸钠溶液0.2ml的离心管中,混合,放入离心机中,转速 3000 转/min,离心 5 分钟。取出后, 弃去上清液,加入生理盐水混合后再离心,然后除去上清液。同法重复一次, 即得洗涤之红细胞。用生理盐水配成 3%混悬液备用。
- 取试管 10 支,从 1—10 分别标记后,排列在试管架上,按表 3-1 配制各种浓度的 NaCl 溶液。
表 3 -110 支试管中分别盛各种浓度的 Nacl 溶液
试 液 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
9 |
10 |
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
1%Nacl(ml) |
1.2 |
1.4 |
1.6 |
1.8 |
2.0 |
2.2 |
2.6 |
3.6 |
4.0 |
|
2%Nacl(ml) |
4.0 |
|||||||||
蒸馏水(ml) |
2.8 |
2.6 |
2.4 |
2.2 |
2.0 |
1.8 |
1.4 |
0.4 |
||
溶液浓度(%) |
0.30 |
0.35 |
0.40 |
0.45 |
0.50 |
0.55 |
0.60 |
0.9 |
1.0 |
2.0 |
-
每支试管放入兔 3%红细胞混悬液 1—2 滴,摇匀,静置半小时后即可观察各试管之溶血现象。
-
管内液体变红而透明者,称完全溶血。记录开始完全溶血管之溶液浓度,这代表红细胞的最高抵抗力,即最小脆性,正常为 0.35—0.30%NaCl 溶液,通常以这个数值表示红细胞的渗透脆性。
-
管内液体混浊,上层带红色者,称不完全溶血。记录开始不完全溶血管之溶液浓度,这代表红细胞的最低抵抗力,即最大脆性,正常约为0.45%NaCl 溶液。
-
管内液体分两层,上层浅黄色透明,下层红色不透明者,称不溶血。