实验 15 血红蛋白含量的测定

【目的要求】

掌握比色法测定血红蛋白含量的方法。

【基本原理】

测定血红蛋白含量的方法很多，实验常用比色法。其原理是在一定量的血液中，血红蛋白经少量盐酸的作用，使亚铁血红素变成高铁血红素，呈现较稳定的棕色。用水稀释后与标准色比较，求出每 100ml 血液中所含的血红蛋白克数。正常成年男子每 100ml 血液平均含 14.4g，女子为 13.1g。

【实验器材】

血红蛋白计、0.1mol/LHCl、刺血针、滤纸片、酒精棉球、乙醚、95%酒精、蒸馏水。

【方法与步骤】 1．血红蛋白计包括①标准比色架，架的两侧镶有两个棕色标准玻璃色

柱。②血红蛋白稀释管，有方形也有圆形的。两侧有刻度，一侧以 g 为计数单位，对侧以百分率计，按我国情况，是以每 100ml 血液内含血红蛋白 14.5g 为 100%。③20mm3 血红蛋白吸管，还有玻璃棒、滴管（图 3-2）。

  1. 用滴管加 0.1mol/LHCl 于血红蛋白稀释管内，到刻度 10 处。

  2. 用刺血针刺破指尖采血，血滴宜大些。用血红蛋白吸管的尖端接触血滴，吸血至刻度

    20mm3 处（0.02ml）。

  3. 用滤纸片或棉球擦净吸管口周围的血液，将吸管插入血红蛋白稀释管的盐酸内，轻轻吹出血液至管底部，反复吸入并吹出稀释管内上层的盐酸，

    洗涤吸管多次，使吸管内的血液完全洗入稀释管内。摇匀或用小玻璃棒搅匀后，放置 10min，使盐酸与血红蛋白充分作用。

  4. 把稀释管插入标准比色架两色柱中央的空格中，使无刻度的两侧面位于空格的前后方，便于透光和比色。

  5. 用滴管向稀释管内逐滴加入蒸馏水（每加一滴要搅拌），边滴边观察颜色，直至颜色与标准玻璃色柱相同为止。稀释管上液面的刻度读数即为每100ml

    血液血红蛋白的克数。

【注意事项】 1．吹血液入稀释管及洗净吸管时，不宜用力过猛。

  1. 蒸馏水需逐滴加入，多做几次比色，以免稀释过量。每次比色时，应将搅拌用的玻璃棒取出，以免影响比色。

  2. 由于操作过程过长而造成吸管内血液凝固，堵塞管孔时，则要按下列溶液的顺序重复冲洗吸管，即用水→95%酒精→乙醚或丙酮。

【思考题】 1．血液中血红蛋白含量的多少是否能反映机体的健康状况？为什么？

2．测定血红蛋白的实际意义是什么？

（谢申玲）