第六章 消化

实验 44 离体小肠段的生理特性

【目的要求】 1.了解哺乳动物离体肠段的一般生理特性。

2.学习离体器官灌流的一种方法。

【基本原理】

哺乳动物的胃肠平滑肌具有自动节律性收缩、伸展性、紧张性和对理化刺激较敏感等生理特性。这些特性对维持消化管一定压力,保持胃肠等一定的形态和位置,适合于消化管内容物的理化变化具有生理意义。在整体内受中枢神经系统和体液因素的调节。本实验观察及记录哺乳动物等离体肠段的一般特性及在一些药物作用下引起的各种效应。

【动物与器材】

兔(大白鼠或鸭)、平滑肌离体灌流恒温装置、常用手术器械、自动控温仪、记纹鼓或记录仪、通用杠杆或张力换能器、温度计、铁支架、O2、棉线、缝针、培养皿、台氏液、肾上腺素(1∶10000)、乙酰胆碱(1∶100000)、0.5mg/ml 阿托品、0.01%磷酸组织胺、1mol/LNaOH、1mol/LHCI、1%BaCl2。

【方法与步骤】

  1. 平滑肌离体灌流恒温装置(图 6-1)包括供应营养液和 O2、保持恒温及记录平滑肌活动等三部分。营养液和 O2 分别由贮液瓶和氧气瓶经橡皮管由营养管送入,营养管内温度由恒

温水浴连接自动控温仪维持。记录部分用通用杠杆和电动连续记纹鼓,也可用张力换能器和记录仪。

  1. 水浴里的水恒温 37℃,营养管内充满台氏液。要不断供应 O2,可调节套在连接氧气瓶橡皮管上的螺旋夹,控制气流速度,使气泡一个一个地进入台氏液中。

  2. 用铁锤击兔或大白鼠的头部,昏迷后,立即剖开腹腔,取出十二指肠至结肠间的肠段,剪成约 3—4cm 小段,放入室温台氏液内轻轻冲洗,以除去肠的内容物。边洗边通入 O2,把肠段夹入另一盛有新鲜台氏液的培养皿内, 继续通 O2 备用。

  3. 营养管内的溶液保持 37℃,然后取出一小段肠,用缝针将肠的一端穿线结扎(只结扎半边肠腔)。结扎线系于通用杠杆或张力换能器上,肠的另一端则穿入一不锈钢的 S 形小钩,把小钩系于营养管底部的半月形弯钩上,使肠段完全浸浴在台氏液中,并立即通入 O2。调节杠杆或换能器的灵敏度后,让肠段稳定 20min,便可以描记其活动曲线。

  4. 依次加入各种药物,观察和记录肠段运动的变化。

(1)肾上腺素(1∶10000) 2 滴

(2)乙酰胆碱(1∶100000) 1—2 滴

(3)1mol/LHCl 1—2 滴

(4)1%BaCl2 2—3 滴

(5)1mol/LNaOH 1—2 滴

(6)0.01% 磷 酸 组 织 胺 1—2 滴

每加入一种药物,当出现反应后,即从侧管放出营养管中的溶液,换入新鲜台氏液,更换 2—3 次,使肠段恢复正常节律。

  1. 在换上新鲜台氏液,肠段恢复节律收缩的基础上,加入乙酰胆碱 3 滴,使引起明显效应,再加入 0.5mg/ml 阿托品 3—4 滴,观察加入阿托品后肠段运动的变化。进行这项试验后,需要多次冲洗,肠段才慢慢恢复活动。

【注意事项】 1.为避免麻醉剂对小肠活动的影响,所以要用铁锤猛击兔或大白鼠的头

部,使之迅速昏迷后即取出小肠段。 2.游离及取出肠段时,动作要快,但要避免过度牵拉或使组织干燥而影

响其活性。整个过程应保持营养液恒温和通入 O2。3.每加入一次药物前需先描记一段肠段运动曲线,加入药物出现效应

后,立即冲洗,更换营养液,待活动恢复后,再进行另一次试验。

【思考题】 1.为什么加入各种药物会引起离体肠段活动的变化?其机理是什么?

2.加入乙酰胆碱后再加入阿托品,肠段活动受到抑制,为什么?

(谢申玲)