第四节 衣藻培养与观察

衣藻（Chlamydomonas）属绿藻植物门。植物体为单细胞，多呈卵形。细胞外表具细胞壁，细胞内具有细胞质和细胞核。在细胞质中具有一枚怀状的叶绿体。叶绿体的底部有一造粉核，前端有一个红色眼点，眼点的感光性很强。从叶绿体的开口处前端细胞质中，向体外伸出两条等长的鞭毛，衣藻靠鞭毛的摆动在水中运动。鞭毛基部有两个伸缩泡（图 1—3）。

衣藻是淡水浮游藻类中的常见种类，容易采集和培养，而且身体结构简单，也很容易观察，因此适于少年儿童开展活动。通过本项活动，可以使少儿了解绿藻植物的一般特征，并培养他们的操作能力。

一、准备用具用品

广口瓶、吸管、培养缸、培养皿、普通载玻片、凹载玻片、盖玻片、显微镜、培养液所需的各种化学试剂（可用有关肥料代替）、碘—碘化钾溶液、白菜汁液等。

二、采集藻种

衣藻常生活在有机物丰富的池塘、水沟或临时积水中，往往以纯群的状态存在。此外，金鱼缸中也常有它们的分布。

（一）到池塘、水沟中采集衣藻

春秋温暖季节，当池塘、水沟中衣藻大量繁殖时，常使水成草绿色，可以用广口瓶盛取这种草绿色的池水，带回实验室，放在窗前向阳处。由于衣藻有向光游动的特性，又由于水表层内含氧最多，所以经过一段时间，在广口瓶向阳面的内壁和水表面的交界处，会出现一条绿线，这条绿线是水中衣藻密度最大的地方。用吸管从绿线处吸取一滴水，置于显微镜下观察，可以在视野中见到一个个绿色椭圆形的细胞，活泼地在水中游动，这就是衣藻。

（二）到临时积水坑中采集衣藻

在夏天雨季，可以到临时积水坑中采集衣藻。衣藻在积水坑中常以纯群状态存在。可用吸管吸取，用广口瓶盛放，带回实验室，按（一）中所说的方法，使衣藻在广口瓶向阳面的内壁和水表面的交界处形成绿线，然后吸取绿线处的水，用显微镜检查采集是否成功。

（三）到金鱼缸中采集衣藻如果少年宫和学校附近，没有池塘、水沟和临时积水坑，则可到金鱼养殖缸中，从向阳面的水表面吸取，带回实验室， 也按（一）中所说的方法，使衣藻在瓶内密集，然后用显微镜检查采集是否成功。

三、培养

（一）配制培养液

衣藻培养液有无机培养液和有机培养液两类。

1. 无机培养液。常用的无机培养液有以下三种配方： 配方一：

本配方为母液，使用时须稀释 10 倍。配方二：

氯化钙 0.3 克

土壤浸出液（煮沸消毒） 5 毫升

水 1000 毫升

本配方为母液，使用时须稀释 10 倍。

1. 有机培养液。将新鲜白菜叶切碎，榨取汁液，加 9

   倍水稀释，煮沸消毒，即成有机培养液。

（二）培养方法

如果要在三五天内观察衣藻，可用有机培养液培养。方法是用吸管从盛有衣藻的广口瓶内的绿线处吸取藻种，接种于培养液中，然后将培养液置于向阳处培养。培养温度应保持在 15℃～25℃。为了使培养液中有充足的氧气，应每隔几小时用玻璃棒搅动培养液一次。两天以后，培养液就会明显转绿，四天以后，衣藻繁殖量就会达到最高峰。这时，一滴培养液中含有大量藻体，是观察衣藻的最好时间。

用有机培养液培养衣藻，虽然繁殖速度很快，但四五天以后会产生沉淀， 衣藻数量迅速下降。因此，当观察结束以后，如果准备继续培养，可将衣藻接种到无机培养液中。无机培养液可以一个月更换一次。在下次观察的前三四天，如果无机培养液的衣藻密度不大，可以再吸出衣藻，接种于有机培养液中，三四天以后又会获得大量衣藻。

四、观察

（一）观察衣藻外形、游动和内部结构

1. 观察外形和游动。用低倍显微镜进行观察。先观察衣藻的身体形状、前端和后端，然后观察衣藻的游动现象。

2. 观察内部结构。为了看清衣藻的内部结构，可以用碘—碘化钾溶液进行染色，用高倍显微镜进行观察。在视野中，能清楚地看到衣藻细胞的细胞壁、细胞质、细胞核、杯状叶绿体及淀粉核等结构。其中，细胞核被染成黄色、淀粉核被染成蓝紫色，如果叶绿体内有分散分布的淀粉粒，也会被染成蓝紫色。将视野光线稍加调暗，还可以看到鞭毛。

（二）观察衣藻繁殖

衣藻繁殖有无性生殖和有性生殖两种，对这两种繁殖方式，少年儿童都可以进行观察。

1. 观察无性生殖。衣藻经常进行无性生殖。当进行无性生殖时，藻体沉到水底，失去鞭毛，原生质体进行分裂，分成 2、4、8、16 块，各长出鞭毛， 成为游动孢子，母细胞成为游动孢子囊。以后游动孢子生出新壁，母细胞壁破裂或胶化，游动孢子被释放出来，长成新个体。

观察无性生殖时，应该从培养缸的底部吸取培养液，制作临时活体装片进行观察，会看到大量孢子囊和游动孢子（图 1—4）。

1. 观察有性生殖。衣藻遇到不良环境时，便进行有性生殖。当进行有性生殖时，藻体的原生质体经过分裂，形成 32～64 个小细胞，叫配子。配子在形态上与游动孢子无大差别，只是比游动孢子小。配子成熟后，从母细胞中被释放出来，游动不久，即成对结合，形成染色体双倍、具四条鞭毛、能游动的合子。合子游动数小时后变圆，形成厚壁合子，壁上常有刺突。合子进行休眠，待环境适宜时，进行减数分裂，产生 4 个游动孢子，破合子壁而出， 各形成一个新个体。

观察有性生殖时，应进行悬滴培养。悬滴培养是人为制造对衣藻生长不良的环境条件，促使它进行有性生殖。方法是将一滴含有衣藻的水，滴在盖玻片上，将盖坡片小心反转，使水滴向下成一悬滴，放在凹载玻片的凹窝上。然后将这一装置放入培养皿中，培养皿加盖，放在有光处培养。按照这一方法进行培养，几小时以后，可在显微镜下找到配子和正在结合的合子（图 1

—5）。