组织培养应用实例例 1,杜鹃花的快速繁殖

杜鹃花是较常见的园艺花卉,品种多栽培容易,通过侧芽增殖的技术, 能在一年内生产几十万株小苗投放市场。具体的方法如下:

外植体的准备:取健壮的嫩枝,去叶后切取顶部 1.0~1.5 厘米的切段, 先用肥皂水洗净,再在 1%~2%的安替福民溶液中灭菌 10~15 分钟,用无菌水冲洗 3 次,将灭菌后的茎段接种在 1/2 的 Andereson 无机盐+2 毫克/升异戊基腺苷+ 0.5 毫克/升吲哚乙酸,3%蔗糖的液体培养基中培养。几周后侧芽生长到 1~2 厘米。

Anderson 培 养 基 配 方 ( 单 位 : 毫 克 / 升 ): NH4NO3400,KNO3480,MgSO4·7H2O370,MnSO4·H2O16.9,ZnSO4·7H2O8.6,

CaCl2·2H2O440, KI O.83,COCl2 0. 83, H3BO3 6.2, NaH2 PO4H2O380, FeSO4·7H2 55.7,Na2-EDTA 74.5,维生素 B1 0.4,肌醇 100。

第一阶段的继代培养:将上述 1~2 厘米的侧芽切下后接种含有 1.5 毫克

/升异戊基腺苷+4 毫克/升吲哚乙酸的 1/2Anderson 培养基中,当新的嫩枝产生时,形成大量的不定芽。这些芽切割后在相同培养基中连续继代培养几次。

第二阶段的继代培养:这一阶段将得到的芽或嫩枝接种在 1~15 毫克/ 升的异戊基腺苷+0.5~4 毫克/升吲哚乙酸的 Anderson 固体培养基中(加0.8%琼脂),激素浓度按品种而异。每二个月每个培养的芽就可生长成 20~

40 个嫩枝。

生根和移栽:有两种方法可使用,一是将嫩枝直接扦插于自然条件下的人工基质中(砂、蛭石、锯末等),保持湿度,促使生根。另一种方法是转移到 1/3 Anderson 培养基中,除去异戊基腺昔和碘化钾,加 0. 5 毫克/升吲哚丁酸和 600 毫克/升的活性碳,一个月后就可产生根系。培养基的 pH 值为 4.5。幼苗移栽后要保持高湿度,防止高温和阳光直射,土壤或人工基质的通气性良好,以利于幼根的生长,提高幼苗移栽的成活率。