诱变育种技术
诱变育种是利用物理、化学因子,促使育种的原始材料的遗传性发生变异,从而选出优良品种的一种育种方法。它包括物理的辐射诱变和化学诱变两种。
辐射诱变是指利用γ-射线、X-射线、β-射线、中子、无线电微波、激光、紫外线等物理因子,照射植物的种子、植株和其他器官,使它们的遗传物质发生变化,产生各种各样的变异,通常称为突变,然后选择符合人们需要的植株进行培育,从而获得新品种。化学诱变则是利用一些化学药品,来浸泡和处理植物的种子或其他器官,促使突变的发生,从而选育出新的品种。
诱变育种是相对于利用自然突变选种(穗选、株选)而言的,植物在自然条件下生长发育,由于受到各种自然条件的作用,它们的遗传物质也会发生变异。但由于自然条件下的各种引起变异的因子的强度较缓和,自然突变的频率较低,发生的变异数往往满足不了育种选择的需要,所以现代育种中往往采取较强的诱变强度,让突变的发生数大大增加,从而加快育种进程。
诱变育种的优点在于:
能大幅度提高植物的变异牢,扩大变异范围:自然突变率一般在十万分之几到百万分之几,而诱变处理后的突变频率可高达 1/30 左右,比自然突变高 1000~10000 倍,同时引起的变异类型多、范围广。如印度用γ-射线处理蓖麻,获得了生育期由 270 天缩短到 120 天的特大变异株系。
能改良品种的第一性状,而保持其他优良性状不变:对于一个具有多种优良性状而只希望改进某一两个性状的品种,采用诱变育种最为有效,它较之利用杂交育种方法相比,容易收到满意的效果。如通过辐射,把燕麦的抗锈病特性和对叶枯病易感性分离开来,培育出了抗锈病又不易感染叶枯病的新品种。
引起的变异稳定快,育种年限短;诱变处理后的子代分离少、稳定快, 一般在第三代就可稳定,而杂交育种的某个性状的稳定往往要在第五到第七代。对于一年只能生长一季的农作物来说,意味着缩短育种时间 2~4 年。
能改变作物的育性,有利于杂种优势的发挥:在常规的杂交育种中,往往要用较多的时间和人力去除掉母本的雄蕊,避免自交现象的发生。用诱变处理母本的种子,可以选育出雄性不育的植株,形成雄性不育系,供杂交育种时使用。由于杂交后的第一代往往表现出杂种优势,发挥了父、母本的各自的优良品质,用它们的子一代作种子来生产,其产量及其他性状往往很好。所以我国现在大面积推广的杂交水稻、杂交玉米、杂交小麦,都取得了明显的经济效益和社会效益,为解决我国广大农民的温饱问题作出了巨大贡献。
诱变育种的中心是利用各种诱变剂提高作物的突变率。但是诱变剂的剂量是一个首先要注意的问题,并非剂量越大越好,要明白诱变剂的处理是建立在对原有细胞中的遗传物质的损伤基础上来加大突变率的,它们的处理对细胞是有伤害的。选择一定的诱变剂量很重要,诱变育种中有相应的三个名词或俗语,那就是“致死剂量”、“半致死剂量”和“临界剂量”。所谓“致
死剂量”是指经诱变处理后,引起全部植株死亡的剂量;“半致死剂量”是指经诱变处理后,成活率在 50%的剂量;而“临界剂量”是指诱变处理后成活率占 40%的剂量。一般诱变育种中多采用“临界剂量”作为最适合的剂量, 使得诱变处理后,既能提高突变率又能保持植物的一定的成活率。因此诱变处理前常常要用少量的育种原材料进行试验,找出这三种剂量,再进行大批的原材料诱变处理。辐射诱变的单位是伦琴(r)和拉特(rad),1 伦琴是 1 克空气中所吸收相当于 83 尔格的射线能量;1 拉特是任何一克被照射的物质,在吸收射线的能量为 100 尔格时的剂量。化学诱变的剂量单位与化学药品的浓度单位一致,常用的有摩尔(mol/L)和微摩尔(μmol/L)。
诱变育种时对原材料的处理部位和方法可以是多种多样的。辐射处理时,可以对种子、营养器官、花粉、子房等多种部位进行照射。以对种子处理最为常见,因为它具有操作方便,能大量处理,便于运输与贮藏,受环境条件影响小等优点。种子处理又可分干种子、湿种子和萌动种子辐射三种。干种子处理时剂量较大;萌动种子对诱变处理最敏感,使用剂量较小。化学诱变也常用化学诱变剂的溶液来浸泡种子,也有的直接用脱脂棉花吸取诱变剂后,处理植株的生长点。常见的化学诱变剂有:叠氮化钠、秋水仙素、甲基磺酸乙酯(EMS)、硫酸二乙酯(DES)、环氧乙烷、乙烯亚胺、 N-亚硝基- N- 乙基尿烷等。这些诱变剂对人畜有毒,使用时应小心,使用后对剩余药品应妥善处理,防止对环境的污染和人畜中毒。
诱变处理后的种子应及时播种,如果放置较长时间以后才播种,其诱变效率会随着贮藏时间的延长而降低。一般不能超过半个月。
选择合适的育种原材料,采用合理的诱变方法和剂量是重要的,但诱变处理的栽培管理和性状选择更为重要。就种子的诱变处理而言,处理后不是胚中所有细胞都发生变异,而只是胚中的部分细胞发生变异。因此,第一代植株的组织上的变异是局部的,它是一个嵌合体。同时由于诱变处理后的变异大多是隐性的,第一代不会表现出来,只有到以后各代中形成纯合型植株时才表现出来,所以第一代植株的栽培管理是首位的。种子因诱变处理后的损伤大,常常会出现种子发芽慢,出苗率低,苗期死亡率高,植株发育缓慢, 生长矮化和畸形,成熟期延迟,在恶劣的环境条件下植株容易死亡等现象。为了有利出苗,要实行浅播,加强苗期管理,减少苗期死亡。
真正的选育工作是从第二代开始的,那些第一代隐性的变异陆续表现出来。对第二代群体进行选择时.要进行整个生育期的观察,当发现新的优异性状的植株,应立即对该株进行挂牌和编号,成熟时仍属优良性状的就将全株单独收获的种子贮藏,下年按株系编号播种。第二代是诱变育种工作的重点, 大部分性状要在这一代进行分离,能遗传的性状也主要从这一代显现出来。为了便于观察与选育,第二代要实行穗行播种,株与株之间的距离也比常规的要大,为单粒穴播或稀条播。同时应注意栽培条件和田间管理,满足作物对水肥的要求,使其优良性状能充分表现出来。
第二代选得的优良单株,在第三代按株系种植。观察鉴定,去除那些不能遗传的形态变异株和综合性状不够理想的变异单株。对优良的、定型的株系,实行全株系收获,以后逐步升入鉴定圃,进行品种的比较试验,以确定其经济特性和产量。在继续分离的株系中,仍继续应用单株选择法选择其中的优良植株,直到品系定型为止。一般选到第四、五代后,品系就已定型, 不必再继续下去了。
当品系定型的新品种产生后,经过种子生产基地的良种繁育,就可以进行推广试验。
为了探讨诱变育种的规律性,总结经验教训,也为推广工作提供足够的资料证明,在育种过程中,必须进行详细的记载。主要记载诱变原材料的名称、来源、组成(品种、杂种、品系或倍数性),诱变处理的部位与剂量、诱变剂名称,处理时的温度、湿度等处理条件,以及处理后的效应(损伤、致死性、不育性、突变率及突变体的主要性状),还应包括选育的过程,各代培育与选育时的情况等。